銷(xiāo)售咨詢(xún)熱線(xiàn):
18964005752
技術(shù)文章
當前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 層析柱的操作方法介紹

層析柱的操作方法介紹

更新時(shí)間:2020-03-31  |  點(diǎn)擊率:2340
1.吸附劑的處理及柱子裝填

將一定量薄層層析硅膠裝入搪瓷盤(pán)置于烘箱中,于105。C活化2H后,取出放置室溫即可裝柱。柱子采用干法填充,填滿(mǎn)整個(gè)柱體,不留死體積,密封后用柱塞式計量溶劑泵按丙酮一石油醚(595)比例泵入溶劑,至溶劑流出止。

2.上樣

將冬凌草的乙醇提取物400G用適量丙酮溶解,泵入中壓柱柱頭,然后泵入石油醚1000RID。

3.洗脫

以一定比例的石油醚一丙酮為洗脫液,60ML/MIN的流速進(jìn)行梯度洗脫,柱的使用壓力為23KG/C 。按每份500ML收集,TLC檢識展開(kāi)劑丙酮一*仿(28),顯色劑5%香草醛濃硫酸乙醇液

至洗脫*,相同流份合并,回收溶劑。將冬凌草甲素流份合并蒸干。加入適量甲醇熱溶后自然放置,析出結晶,為冬凌草甲素。

4.層析柱再生、平衡

有效成分經(jīng)TLC檢識全部流出后,用純丙酮5000ML再生,丙酮一石油醚(595)平衡后,可再次上樣,反復使用(使用次數隨原料不同而異,一般可連續使用26個(gè)月以上)。

5.重結晶

冬凌草甲素結晶析出*后,減壓過(guò)濾,然后用少量甲醇洗滌(洗滌液保留,作下次熱溶冬凌草甲素用)。將冬凌草甲素再用適量甲醇熱溶后放置,結晶再次析出,待結晶*后,抽濾,用少量乙*洗滌,將結晶室溫下晾干后置真空干燥箱中,35度真空干燥至恒重。密封于瓶中,置干燥器中保存。

6.薄層層析分析

取適量冬凌草甲素對照品及由上述方法得到的冬凌草甲素樣品甲醇溶解后點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以*仿一丙酮(82)為展開(kāi)劑進(jìn)行展開(kāi),5% 香草醛濃硫酸乙醇液顯色,于105。C烘至斑點(diǎn)清晰。表明在該展開(kāi)系統下,冬凌草甲素樣品和對照品都具有相同的RF值,并呈現出同樣的藍綠色斑點(diǎn),在制備的冬凌草甲素樣品中,沒(méi)有雜質(zhì)斑痕。

聯(lián)


国偷自产第一区二区三区Av_免费观看毛片_人人妻人人摸_日韩熟妇在线视频播放